Guía de reconstitución y almacenamiento

Qué es la reconstitución

Los péptidos se envían liofilizados porque la forma seca es estable. La reconstitución es el paso que convierte ese sólido de vuelta en una solución de concentración conocida, y es el momento en el que quedan fijadas dos cosas: qué tan concentrado está el material, y cuánto tiempo se va a mantener utilizable.

Ninguna de las dos cosas se puede corregir después. Agregar demasiado solvente no se puede deshacer, y un vial reconstituido con el solvente equivocado no se puede salvar. Vale la pena ser cuidadoso en un paso que lleva dos minutos.

Cómo elegir un solvente

Dos solventes cubren casi todos los péptidos de investigación, y la página de cada compuesto indica cuál corresponde.

Agua bacteriostática

Agua estéril con 0,9% de alcohol bencílico, que frena el crecimiento microbiano. Es la opción por defecto para la gran mayoría de los péptidos, y la razón por la que un vial reconstituido se conserva semanas en vez de días. El agua estéril simple funciona químicamente pero no ofrece protección bacteriostática, así que acorta bastante la vida útil.

Ácido acético diluido

Un número reducido de péptidos —generalmente los que se agregan o se disuelven mal a pH neutro— se reconstituyen bien solo en una solución levemente ácida. Cuando corresponde, la página de producto lo indica explícitamente. Usar agua en un péptido que necesita ácido acético normalmente se nota como material que no termina de disolverse, y forzarlo no ayuda.

La aritmética

La concentración es todo lo que hay que saber:

Concentración (mg/mL) = péptido en el vial (mg) ÷ solvente agregado (mL)

Un vial de 10 mg reconstituido con 2 mL de agua bacteriostática queda en 5 mg/mL. El mismo vial con 1 mL queda en 10 mg/mL. La cantidad de péptido nunca cambia — solo cambia qué tan diluida queda, y por lo tanto qué volumen corresponde a una cantidad dada.

En una jeringa de insulina U-100 estándar, 100 unidades equivalen a 1 mL, así que un volumen en mililitros multiplicado por 100 da la marca hasta la que hay que cargar. Nuestra calculadora de reconstitución hace todo esto en ambos sentidos, incluida la inversa, que es útil: cuánto solvente agregar para que una cantidad dada caiga justo en una marca cómoda.

No existe un volumen universalmente correcto. Más solvente da más resolución en la jeringa a costa de una carga más grande; menos solvente da cargas más chicas y más difíciles de medir con precisión. La mayoría de los investigadores terminan eligiendo lo que deja su cantidad de trabajo en algún punto medio del cuerpo de la jeringa.

Cómo manejar el vial

• Dejá que un vial frío llegue a temperatura ambiente primero. La condensación sobre el vidrio frío introduce agua que no tuviste en cuenta.
• Agregá el solvente despacio, por la pared interna del vial. Apuntar un chorro directo sobre la película de péptido es innecesariamente brusco.
• Girá el vial con suavidad, o dejalo reposar. No lo agites. Un péptido funciona por la forma en la que se pliega, y esa forma se mantiene con uniones lo bastante débiles como para que agitar el vial —y la espuma que eso genera— pueda deshacerla. Algunos tardan varios minutos en disolverse por completo; eso es normal y esperar no cuesta nada.
• Mirá el resultado. Una solución bien reconstituida es transparente. La turbidez persistente, las partículas visibles o el material que no se disuelve después de reposar son motivo para parar y revisar el solvente indicado para ese compuesto.
• Etiquetá el vial de inmediato con la concentración y la fecha. Un vial de líquido transparente no lleva ninguna información sobre sí mismo, y dos semanas después vos tampoco te vas a acordar.

Almacenamiento

Cada página de producto tiene una tabla de almacenamiento específica para ese compuesto, dividida entre sin reconstituir y reconstituido. Como orientación general:

Sin reconstituir, liofilizado. El requisito es frío y oscuro, y cuanto más frío mejor para lo que se guarda a largo plazo. Bien conservada, la forma seca es estable durante un período que se mide en años, no en semanas. La temperatura ambiente es tolerable por los días que dura un envío en tránsito, por eso normalmente no hace falta cadena de frío.

Reconstituido, en solución. Refrigerado, y usado dentro de la ventana indicada para ese compuesto — generalmente unas semanas con agua bacteriostática. Lo que más vale la pena evitar son los ciclos repetidos de congelado y descongelado: cada uno estresa la molécula, así que es preferible fraccionar el vial antes de congelarlo en vez de descongelar y volver a congelar el mismo vial.

Luz y calor. Los dos degradan los péptidos en solución. Los viales van en su caja, en la heladera, no en una estantería ni en el alféizar de una ventana.

Registro

Vale la pena llevar junto al vial: el compuesto y el lote, la fecha de reconstitución, el solvente usado, el volumen agregado, y la concentración resultante. Es una sola línea, y es la diferencia entre un material caracterizado y uno desconocido — que es toda la distinción sobre la que se sostiene esta categoría.